一、ABI7900熒光定量PCR儀是繼7700、5700型熒光定量PCR儀之后，ABI公司推出的高通量實時熒光定量PCR系統。它是兼容96孔板和384孔板的熒光定量PCR儀，也是可選手工進樣和自動進樣的熒光定量PCR儀。7900HT型熒光定量PCR儀可滿足從中通量到高通量實驗的需求。  

二、ABI7900熒光定量PCR儀主要特點:  

（1）高效平臺-7900HT系(xi)統是為(wei)支持(chi)高通量而構建的(de)，光(guang)學系(xi)統經優(you)化以適用(yong)于(yu)384孔板熒(ying)光(guang)信號的(de)激活和實(shi)時檢測。  

（2）結(jie)果(guo)可靠-7900HT系(xi)統采用了與(yu)7700、5700相(xiang)同的(de)定(ding)(ding)量原理(li)，利用Ct值（Ct定(ding)(ding)義為在基線上(shang)方產生可檢測(ce)到的(de)統計學上(shang)顯著的(de)熒光發(fa)射的(de)這一(yi)PCR循環）和(he)起始(shi)拷貝數(shu)的(de)對應關系(xi)，通過外標準曲線精確計算未知樣品的(de)起始(shi)拷貝數(shu)。  

（3）高度重現性-7900HT系統的(de)熒(ying)光(guang)檢測(ce)發(fa)生在PCR對數期的(de)起始，因此反應管中各組(zu)分沒(mei)有任何限制反應因素，從(cong)而確保檢測(ce)結果都是精確并(bing)能重復的(de)。  

（4）先進(jin)的(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)檢測(ce)技(ji)術(shu)-RISM®7900HT熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)定量PCR系統在不降低(di)速(su)度、分(fen)辨率(lv)的(de)情況下有(you)效提高了(le)產率(lv)，這是基于先進(jin)的(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)檢測(ce)技(ji)術(shu)：一束激光(guang)(guang)(guang)(guang)掃描(miao)并激活(huo)384個(ge)孔的(de)每一個(ge)孔里的(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)染(ran)料(liao)，熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)信號通(tong)過光(guang)(guang)(guang)(guang)柵分(fen)光(guang)(guang)(guang)(guang)，經過分(fen)離的(de)多色熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)同時到(dao)達CCD攝(she)像機，實現多色熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)同時檢測(ce)。  

（5）自(zi)動(dong)進樣(yang)裝置-7900HT系(xi)統配備有(you)自(zi)動(dong)化配件(jian)可(ke)(ke)取得高效率。自(zi)動(dong)化裝置可(ke)(ke)容納84塊(kuai)384孔板(ban)，機(ji)(ji)械手臂可(ke)(ke)按(an)一定順序將待測(ce)樣(yang)品(pin)板(ban)運(yun)送至主機(ji)(ji)內，配備的條形碼閱讀器（Barcodereader）可(ke)(ke)自(zi)動(dong)識別進入主機(ji)(ji)的樣(yang)品(pin)板(ban)編號，使你在任(ren)何時(shi)間可(ke)(ke)以在樣(yang)品(pin)行(xing)列(lie)中插(cha)入或替代樣(yang)品(pin)板(ban)。  

（6）多樣的(de)(de)化學試劑-7900HT型熒(ying)光定量PCR儀上可使用(yong)(yong)的(de)(de)化學試劑包括(kuo)TaqMan熒(ying)光探(tan)針法和SYBRGreen熒(ying)光染料法。TaqMan探(tan)針法具有高(gao)度(du)的(de)(de)靈敏度(du)和特異性，適(shi)用(yong)(yong)于(yu)實(shi)時(shi)定量的(de)(de)多重反應(ying)或(huo)單核苷(gan)酸多態性分析（SNP）。SYBRGreen染料應(ying)用(yong)(yong)于(yu)目標鑒定（篩選測定）或(huo)者在(zai)只需用(yong)(yong)少數(shu)幾個(ge)反應(ying)的(de)(de)測定中為理(li)想(xiang)。  

（7）有(you)效防污染-7900HT系統在(zai)(zai)(zai)PCR全過(guo)程中(zhong)使用專(zhuan)門設(she)計(ji)的和(he)始終密閉的樣品管。在(zai)(zai)(zai)加(jia)入樣品和(he)試劑(ji)后這些管子便立即封閉并在(zai)(zai)(zai)擴(kuo)增(zeng)和(he)檢測過(guo)程中(zhong)保持這種(zhong)狀態，這樣就可以(yi)大(da)大(da)地(di)減(jian)少污染的機會(hui)；此外(wai)，7900HT系統不存在(zai)(zai)(zai)PCR后處理，有(you)效防止擴(kuo)增(zeng)產物對(dui)實驗(yan)環(huan)境的污染而造成的假陽性。  

（8）多(duo)種(zhong)定(ding)量(liang)方(fang)(fang)法(fa)-ABIPRISM®7900HT序列檢測系統軟件(jian)為(wei)基(ji)因(yin)表達提供一種(zhong)定(ding)量(liang)化方(fang)(fang)法(fa)。定(ding)量(liang)是從(cong)一個標準曲線上直(zhi)接測定(ding)目標（基(ji)因(yin)）的量(liang)。相(xiang)(xiang)對定(ding)量(liang)方(fang)(fang)法(fa)是通過與標定(ding)樣(yang)品相(xiang)(xiang)比較而計算未知樣(yang)品的量(liang)，不需要標準曲線。  

三、原理(li)介紹：  

1.定(ding)量，為了測(ce)定(ding)未知樣品中(zhong)(zhong)的(de)目標(biao)(biao)（基因）的(de)數(shu)(shu)(shu)量，7900HT系統(tong)可用來(lai)測(ce)定(ding)樣品的(de)CT，然后(hou)用一條(tiao)標(biao)(biao)準曲線(xian)(xian)來(lai)測(ce)定(ding)起始(shi)的(de)拷(kao)貝數(shu)(shu)(shu)。在標(biao)(biao)準曲線(xian)(xian)的(de)繪(hui)制(zhi)中(zhong)(zhong)，7900HT系統(tong)軟件首先用已知的(de)起始(shi)拷(kao)貝數(shu)(shu)(shu)的(de)幾種稀釋度計算它(ta)們的(de)CT值(zhi)。接著，軟件使用測(ce)得的(de)CT值(zhi)對(dui)應于起始(shi)拷(kao)貝數(shu)(shu)(shu)的(de)對(dui)數(shu)(shu)(shu)值(zhi)作圖。至少在五個數(shu)(shu)(shu)量級范圍中(zhong)(zhong)兩(liang)者(zhe)呈(cheng)線(xian)(xian)性關(guan)系。  

2.相(xiang)對(dui)定(ding)(ding)量，對(dui)于基因表達研(yan)究來說(shuo)，相(xiang)對(dui)定(ding)(ding)量是理想的(de)方法。這(zhe)里(li)不是應用(yong)(yong)標準曲線(xian)而是相(xiang)對(dui)于標定(ding)(ding)樣(yang)品(pin)計(ji)算表達水平(ping)。用(yong)(yong)一個(ge)內源對(dui)照來標定(ding)(ding)樣(yang)品(pin)的(de)量。這(zhe)一方法與7900HT系統在(zai)一個(ge)多重反應中能同時對(dui)目標和內源對(dui)照進行(xing)定(ding)(ding)量測(ce)定(ding)(ding)的(de)能力相(xiang)結(jie)合，可(ke)實(shi)現高效、高通(tong)量的(de)基因表達研(yan)究。  

3.有效的(de)SNP檢測(ce)手段，除實時(shi)定量測(ce)定以外，7900HT系統包括(kuo)對(dui)于已(yi)知的(de)單一(yi)核苷酸多態(tai)性（SNPS）作大(da)規模篩(shai)選的(de)軟(ruan)件(jian)(jian)。在(zai)一(yi)對(dui)等位基因(yin)系統中，用對(dui)應于兩個(ge)等位基因(yin)的(de)兩個(ge)TaqMan探針在(zai)同一(yi)個(ge)試管中做多重PCR反應。反應終止時(shi)所產生的(de)熒光用7900HT系統進行測(ce)定，實驗(yan)結果(guo)通過分析軟(ruan)件(jian)(jian)迅速取(qu)得。  

四、儀器(qi)規(gui)格和(he)技術(shu)指標:  

（1）系統組(zu)成，7900HT熒光(guang)(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)－384孔或96孔可更換式半導體控(kong)溫PCR儀(yi)，488nm長壽氬(ya)離(li)子激光(guang)(guang)器，X,Y雙軸同步熒光(guang)(guang)掃描頭。  

（2）光柵和CCD檢測裝置，自動進樣裝置，DELLGX270電腦，Windows2000操作系(xi)統，儀器控制(zhi)，數據采集及(ji)結果分析(xi)軟件，PrimerExpress引物探(tan)針設計軟件。  

（3）大產(chan)率(lv)，實時定量檢測－5000樣(yang)品/天（標準模式），96樣(yang)品/35分(fen)(fen)鐘（快速模式），終點SNP分(fen)(fen)析－30000樣(yang)品/2.5小時。  

（4）裝機(ji)指標，以99.7%的置信度明確區分濃度差別兩倍（5000和10000拷貝）的樣(yang)品的定量結(jie)果試劑和消耗品。  

（5）完備的通(tong)用基(ji)本試劑盒(he)和消耗品，十(shi)二萬(wan)(wan)種TaqmanGeneExpressionAssays人、大鼠(shu)、小(xiao)鼠(shu)基(ji)因組(zu)基(ji)因表達(da)分析試劑盒(he)，二百(bai)萬(wan)(wan)種TaqmanValidatedSNPGenotypingAssays人、大鼠(shu)、小(xiao)鼠(shu)基(ji)因組(zu)SNP檢測試劑盒(he)。  

（6）Taqman低密度表達譜芯片，CustomAssays代(dai)客設(she)計、合成(cheng)引(yin)物探針服務(wu)。